原代細胞是指從機體取出後立即培養的細胞。一般情況下，常把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱爲原代細胞培養。原代細胞培養需經過準備、處理、剪切、消化分離、計數、培養這幾個階段。具體說明如下：
1、準備：取各種已消毒的培養用品置於淨化檯面，進行操作前的洗手、消毒。
2、處理：點燃酒精燈，把組織塊置於燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污。
3、剪切：用手術刀將組織切成若干小塊，加入比組織塊總量多30-50倍的胰蛋白酶液，然後一併倒入三角燒瓶中，結紮瓶口或塞以膠塞。
4、消化分離：將三角燒瓶置於用恆溫水浴，每隔20分鐘搖動一次，在消化過程中發現消化液混濁時，可在鏡下觀察，如果組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，進行低速分離後加入適量含有血清的培養液。
5、計數：用計數板計數，對大多數細胞來說，pH需要控制在7.2-7.4範圍內。
6、培養：置於37℃的CO2溫箱培養，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布棉塞易生黴菌，每次換液時需要換新塞。
